离子交换层析

离子交换层析(IEX)是一种根据分子的电荷性质来分离分子的技术。带正电荷的分子将与阳离子交换剂(CEX)结合,带负电荷的分子将与阴离子交换剂(AEX)结合。

IEX最常见的应用是精纯目标分子,但也可以用来捕获如病毒载体等产物。

为您的离子交换层析工艺寻求合适的解决方案

离子交换树脂用于去除杂质,且其展现了对中小型蛋白质良好的结合能力。此外,耐盐Hypercel Star AX阴离子交换树脂无需原料流操作,即能简单地整合工艺。


Q Ceramic HyperD

DEAE Ceramic HyperD

CM Ceramic HyperD

Hypercel Star AX?

粒径

50 ?m?50 ?m?50 ?m?80 ?m?

动态结合能力 (10 % BT)

> 85 mg/mL BSA?

> 85 mg/mL BSA?

> 60 mg/mL IgG?> 100 mg/mL BSA?

功能

强阴离子交换?

弱阴离子交换

弱阳离子交换

弱阴离子交换 (耐盐)

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离子交换膜也用于抛光单克隆抗体。与树脂相比,薄膜可适应更高的流速以在更短的过程时间中拥有更高的生产力。此外,与树脂相比,膜对病毒、病毒样颗粒和其他大型复合物具有更高的结合能力。因此,它们被广泛用于捕获这些分子。我们的薄膜可应用于赛多利斯现有的设备。

Sartobind? Q?Sartobind STIC?Sartobind? S?

孔径

3-5 ?m?3-5 ?m?3-5 ?m?

功能

强阴离子交换

弱阴离子交换 (耐盐)

强阳离子交换?

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制备型和分析型整体柱

正确的色谱工具用于正确的任务——以及使用它们的技能。

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离子交换树脂

Q Ceramic HyperD?

Q Ceramic HyperD?是一种强阴离子交换树脂,适用于去除阴离子杂质(即宿主细胞蛋白质和DNA)。其50?m微珠可在需要时为精纯应用提供高分离度。

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引言

Q、DEAE和CM Ceramic HyperD?F离子交换层析树脂采用专有的“壳内凝胶”设计,提供快速传质和高效结合。它依赖于一种在刚性陶瓷珠的巨孔内聚合的高容量水凝胶。

特点和优势

  • 高流速下的高动态结合能力
  • 刚性、不可压缩树脂
  • 耐盐CM Ceramic HyperD? F树脂降低了超滤/渗滤的要求。
  • 重组蛋白
  • 质粒纯化
  • 酶、血浆蛋白质的纯化
  • 疫苗
  • 单克隆抗体直接捕获(CM Ceramic HyperD? F)
  • IgM
编号

Q 树脂

DEAE 树脂

CM 树脂

平均粒径(?m)

50

50

50

动态结合能力(mg/mL) 200 cm/hr下10%穿透BSA*
> 85?
BSA*
> 85?
IgG
> 602
离子团数量(?Eq/mL)

>?250

>?200

250 - 400

工作pH

2 -12

清洗pH

1-14

耐压性

70 barg (1,000 psi)

体积因pH和离子强度变化而变化不可压缩

* BSA =牛血清白蛋白
??50 mM Tris-HCl中含5 mg/mL BSA , pH 8.6
250 mM醋酸钠、100 mM NaCl中含25 mg/mL hu IgG,pH 4.7

Q Ceramic HyperD? F 树脂和预包装色谱柱

包装尺寸

种类

部件号

25 mL?

大多数树脂

20066-031

100 mL

大多数树脂

20066-023

1 L

大多数树脂

20066-015

5 L

大多数树脂

20066-064

10 L

大多数树脂

20066-056

5x 50, 1 mL, 1/pkg

预包装色谱柱

PRC05X050QCHDF01

索取报价


Q, S, DEAE, CM Ceramic HyperD? F -离子交换树脂

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DEAE Ceramic HyperD?

DEAE Ceramic HyperD?是一种用于精纯纯化的弱阴离子交换剂。利用蛋白质和配体的电荷变化,通过改变电导率和pH值来优化纯化步骤。

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引言

Q, DEAE and CM Ceramic HyperD? F 离子交换层析树脂采用专有的“壳内凝胶”设计,提供快速传质和高效结合。它依赖于一种在刚性陶瓷珠的巨孔内聚合的高容量水凝胶。


特点和优势

  • 高流速下的高动态结合能力
  • 刚性、不可压缩树脂
  • 耐盐CM Ceramic HyperD F吸附剂降低了超滤/渗滤的要求。
  • 重组蛋白
  • 质粒纯化
  • 酶、血浆蛋白质的纯化
  • 疫苗
  • 单克隆抗体直接捕获 (CM Ceramic HyperD? F)
  • IgM
编号

Q Resin

DEAE Resin

CM Resin

平均粒径(?m)

50

50

50

动态结合能力(mg/mL) 200 cm/hr下10%穿透BSA*
> 85?
BSA*
> 85?
IgG
> 602
离子团数量(?Eq/mL)

>?250

>?200

250 - 400

工作pH

2 -12

清洗pH

1-14

耐压性

70 barg (1,000 psi)

体积因pH和离子强度变化而变化不可压缩

* BSA =牛血清白蛋白
? 50 mM Tris-HCl中含5 mg/mL BSA , pH 8.6
250 mM醋酸钠、100 mM NaCl中含25 mg/mL hu IgG,pH 4.7

DEAE Ceramic HyperD? F树脂

包装尺寸

部件号

25 mL?

20067-039

100 mL

20067-021

1 L

20067-013

5 L

20067-054

10 L

20067-047

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Q, S, DEAE, CM Ceramic HyperD? F -离子交换树脂

PDF | 774.2 KB

CM Ceramic HyperD?

CM Ceramic HyperD?是一种用于精纯应用的弱阳离子交换剂。电导率和pH值的变化可利用蛋白质和配体的电荷变化来优化纯化步骤。

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引言

Q、DEAE和CM Ceramic HyperD?F离子交换层析树脂采用专有的“壳内凝胶”设计,提供快速传质和高效结合。它依赖于一种在刚性陶瓷珠的巨孔内聚合的高容量水凝胶。

特点和优势

  • 高流速下的高动态结合能力
  • 刚性、不可压缩树脂
  • 耐盐CM Ceramic HyperD? F树脂降低了超滤/渗滤的要求。
  • 重组蛋白
  • 质粒纯化
  • 酶、血浆蛋白质的纯化
  • 疫苗
  • 单克隆抗体直接捕获?(CM Ceramic HyperD? F)
  • IgM

编号

Q 树脂

DEAE 树脂

CM 树脂

平均粒径(?m)

50

50

50

动态结合能力(mg/mL) 200 cm/hr下10%穿透BSA*
> 85?
BSA*
> 85?
IgG
> 602
离子团数量(?Eq/mL)

>?250

>?200

250 - 400

工作pH

2-12

清洗pH

1-14

耐压性

70 barg (1,000 psi)

体积因pH和离子强度变化而变化不可压缩

* BSA = 牛血清白蛋白
? 50 mM Tris-HCl中含5 mg/mL BSA , pH 8.6
250 mM醋酸钠、100 mM NaCl中含25 mg/mL hu IgG,pH 4.7

CM Ceramic HyperD? F 树脂和预包装色谱柱

包装尺寸

类型

部件号

25 mL?

复合树脂

20050-035

100 mL

复合树脂

20050-027

1 L

复合树脂

20050-019

5 L

复合树脂

20050-050

10 L

复合树脂

20050-043

5x 50, 1 mL, 1/pkg

预包装色谱柱

PRC05X050CMCHDF01

200 ?l,?row of 8

预包装色谱柱

SR2CMCHDF

600 ?l,?row of 8

预包装色谱柱

SR6CMCHDF

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Q, S, DEAE, CM Ceramic HyperD? F -离子交换树脂

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Hypercel Star AX

Hypercel Star AX是一种含有伯胺官能团的耐盐阴离子交换剂。其无需进样流操作就可以简单地整合到纯化工作流程。

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耐盐高级回收阴离子交换层析树脂

HyperCel STAR AX树脂是一种工业级可扩展阴离子交换层析树脂,旨在用于在中等或较高盐导率(2-15 mS/cm)的条件下高效捕获蛋白质,是典型的未稀释生物原料(即哺乳动物细胞培养上清液、大肠杆菌原料、血浆等…)。

应用包括直接捕获重组蛋白、单克隆和多克隆抗体、血浆衍生物或其他生物药物。

由于HyperCel STAR AX树脂能够直接从未稀释的原料流中捕获蛋白质,因此在目标物纯化之前,即在通过蛋白质A亲和步骤捕获单克隆抗体之前,HyperCel STAR AX树脂也可用于早期污染物去除(即CHO宿主细胞蛋白质)。

HyperCel STAR AX树脂采用大规模生产,满足工业用户和监管机构的需求。这种树脂的特性:

  • 停留时间短(2分钟或以下)、动态结合能力高(DBC)
  • 在适度或高电导率下直接捕获未稀释原料中的蛋白质
  • 适用于快速加料处理的优良流速特性
  • 独特的选择性、在较宽的电导率范围内(2–15 mS/cm)保持一致性
  • 增强工艺经济性

应用1.直接捕获未稀释血浆中的白蛋白

目的是评估HyperCel STAR AX树脂作为两步纯化工序的第一步,以从未稀释血浆中捕获人血清白蛋白(HSA)(电导率11 mS/cm)。HyperCel STAR AX树脂被用作第一步捕获步骤,然后进行正交阳离子交换步骤,无需调节血浆的pH值或电导率。未稀释净血浆(pH7.6,11mS/cm)用30 mg/mL的DBC载量。

在96孔滤板上进行实验设计(DoE),以确定到达最佳收率/纯度比的最佳条件。

然后将这些条件转移到PRC预装柱上的柱层析上。

将在96孔板中确定的条件应用于未稀释血浆在1 mL PRC预装柱中HyperCel STAR AX树脂上的层析分离。组分的层析和SDS-PAGE分析证实,大多数污染物是通过高电导率冲洗消除的,仅一步分离就得到99%纯度的HSA组分,且收率为90%。

此外,在未稀释血浆捕获步骤中使用的HyperCel STAR AX树脂的DBC>30 mg/mL,比在这些条件下测试的常规DEAE琼脂糖树脂的DBC高出了2倍以上。

通过不添加盐而仅仅降低pH(4.0)洗脱出了HAS,且其可在正交阳离子交换柱上直接负载。

负荷容量 (mg/ml)收率纯度
HyperCel STAR AX树脂上捕获未稀释血浆

> 30 mg/mL

90%

99%


应用2.在蛋白A捕获单克隆抗体(MAb)之前,早期去除CHOP。

本研究的目的是评估在传统蛋白质A捕获哺乳动物细胞培养液中的单克隆抗体(MAb)之前使用HyperCel STAR AX树脂进行预纯化步骤的影响。


采用商业ELISA检测比较了两种纯化方案中污染中国仓鼠卵巢蛋白(CHOPs)的含量。

数据显示,在蛋白A之前使用HyperCel STAR AX树脂可以更好地降低CHOP(>8倍)。由于这种协同效应,从初始宿主细胞蛋白(HCP)含量413000 ppm开始,最终CHOP水平减少至~400 ppm(减少3个对数),单克隆抗体回收率为90%。


预纯化步骤可以通过延长昂贵蛋白质A柱(单克隆抗体捕获标准步骤)的使用寿命而积极影响工艺经济性。

HyperCel STAR AX树脂由刚性纤维素基质组成,具有优良的流速特性,反向压力低,与生产规模蛋白质生产的需求一致。该树脂有多种包装配置以及方便的1ml和5ml PRC预装柱,用于快速方法优化、选择性筛选或小型制备工作。HyperCel STAR AX树脂是以含有20%(v/v)乙醇的1 M NaCl浆液/悬浮液的形式供应,或以湿润团块的形式供应工艺规模的应用(湿润团块的树脂有助于树脂传递,避免了大量材料体积的搅拌和悬浮)。

HyperCel STAR AX树脂具有化学稳定性,确保了可进行简单的就的清洗(CIP)和储存。对于标准CIP,建议使用0.5至1 M NaOH清洗,而可在10至100 mM NaOH中长期储存。


主要特性

主要特性

80 ?m

离子交换配体伯胺

动态结合能力1

pH值在7.5 – 8.0范围内>100 mg BSA/mL,电导率为15 mS/cm
原料电导率典型工作范围

2 – 15 mS/cm

建议清洗条件2

1 M NaOH

1 采用5 mg/mL BSA 的25 mM Tris-HCl、0.14 M NaCl溶液(保留时间2分钟)。

2 进样5个柱体积(CV)的0.5 – 1 M NaOH溶液,接触时间1小时。

HyperCel STAR AX 树脂和预装柱

尺寸

种类

部件号

25 mL

复合树脂

20197-026

100 mL

复合树脂

20197-032

1 L

复合树脂

20197-046

5 L

复合树脂

20197-058

10 L

复合树脂

20197-064

5x 50, 1 mL

预装柱?(PRC)

PRCSTARAX1ML

8x 100, 5 mL

预装柱?(PRC)

PRCSTARAX5ML

200 μL, row of 8

预装柱 (RoboColumn)

SR2STARAX

600 ?L, row of 8

预装柱 (RoboColumn)

SR6STARAX

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HyperCel STAR Ax离子交换树脂耐盐高级回收阴离子交换层析树脂

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离子交换膜

Sartobind? Q

Sartobind?Q是一种以季铵为配体的强碱性阴离子交换剂。此膜提供两种不同厚度的一次性使用型号。

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Sartobind STIC?

Sartobind?STIC? PA 是一种耐盐弱碱性阴离子交换剂。配体是伯胺。由于其耐盐性,可在高电导率环境下高效工作。这种膜用于具有标准床高的即用型设备。

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Sartobind? S

Sartobind? S 是一种以季铵为配体的强碱性阴离子交换剂。此膜提供两种不同厚度的一次性使用型号。

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